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保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪或荧光光度计
适用样本
细胞 /组织 /纯化的重组酶
仪器准备
1.荧光酶标仪或荧光光度计，
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液等
2.蛋白定量试剂盒
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
使用方法
电子版仅供参考，最终以试剂盒的纸质说明书为准！
样品处理
液体样品：
直接测定。
细胞样品：
1. 收集5×106个以上的细胞，在4℃，500×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液A，高速涡旋振荡15秒。
4. 置冰上持续振荡20-45分钟。
5. 在4℃，12,000×g条件下离心15分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用 BCA 法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测或者-80℃冰箱保存备用。
组织样品：
1. 取适量组织样本剪碎，预冷的 PBS 冲洗去除残留血液，无菌滤纸吸干表面液体，快速称重后剪碎。
2. 按照每50 mg/100 μl冷的裂解缓冲液A，用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见组织块。
3. 冰上振荡20-45分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
4. 在4℃，12,000×g条件下离心5分钟。
5. 将中层上清液吸入另一预冷的干净离心管。
6. 用 BCA 法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测或-80℃冰箱保存备用。
蛋白定量
对上述处理过的上清进行蛋白定量。
HDAC3活性检测
样品处理
液体样品：
直接测定。
细胞样品：
1. 收集5×106个以上的细胞，在4℃，500×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入50 μl冷的裂解缓冲液A，高速涡旋振荡15秒。
4. 置冰上持续振荡20-45分钟。
5. 在4℃，12,000×g条件下离心15分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用 BCA 法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测或者-80℃冰箱保存备用。
组织样品：
1. 取适量组织样本剪碎，预冷的 PBS 冲洗去除残留血液，无菌滤纸吸干表面液体，快速称重后剪碎。
2. 按照每50 mg/100 μl冷的裂解缓冲液A，用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见组织块。
3. 冰上振荡20-45分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
4. 在4℃，12,000×g条件下离心5分钟。
5. 将中层上清液吸入另一预冷的干净离心管。
6. 用 BCA 法测定蛋白浓度。
7. 置于冰上立即检测或-80℃冰箱保存备用。
蛋白定量
对上述处理过的上清进行蛋白定量。
HDAC3活性检测
常见问题分析
荧光强度值偏低？
1. 样品上样量不够：
2. 样本不新鲜
3. 样品裂解不够充分：
1. 样品上样量不够：
2. 样本不新鲜
3. 样品裂解不够充分：
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